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服務介紹

化合物 pull down 實驗原理


無論藥物研發還是基礎科研,檢測化合物(如小分子藥物)與蛋白質之間的相互作用都是一類重要的實驗。化合物pull down是體外研究化合物與蛋白質相互作用的方法。利用生物素與鏈霉親和素之間的高親和力,可以從各種類型目標樣本中調取目標化合物的結合蛋白。

 

生物素標記的化合物先與鏈霉親和素磁珠孵育,之后與樣本蛋白液孵育,目標化合物及其結合蛋白便一起吸附在磁珠上。洗滌去掉未結合的蛋白后,用洗脫液將結合蛋白從磁珠上洗脫下來,之后可以采用Western Blot技術檢測特定的結合蛋白,還可以采用質譜方法鑒定與目標化合物結合的未知蛋白。




化合物pull-down實驗-輝駿服務優勢



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輝駿生物10年科研服務經驗,專業提供分子互作實驗服務,包括蛋白與蛋白、蛋白與化合物、蛋白與RNA、RNA與RNA的相互作用技術;經驗豐富,實驗結果穩定、可靠。
?我公司自有質譜實驗平臺,對微量互作蛋白的質譜鑒定有充足把控力,對后續功能分析有獨到見解。
?提供專業的化合物pulldown、小分子pulldown、藥物pulldown等領域售前方案建議、售后技術支持將一直保持到文章發表,確保您安心進行下游實驗及投稿
?目前,客戶已在Nature子刊、Oncogene、Cell Research等高水平期刊成功發表大量高分文章(點擊查看客戶文獻)。
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化合物pulldown實驗技術原理


化合物pull down實驗技術服務步驟,pull-down化合物實驗外包公司




化合物Pull down技術實驗—輝駿服務內容


服務項目服務內容結果交付實驗周期客戶提價格

化合物 pull down WB

(驗證型)

Western blot檢測樣本中的待測蛋白Western blot檢測圖4-5周

實驗樣本

生物素標記的化合物和單生物素對照

待測蛋白抗體

實驗信息表





pull-down捕獲生物素標記化合物及其結合蛋白

Western blot檢測圖

pulldown實驗報告

化合物 pull down MS

(篩選型)

pulldown捕獲生物素標記化合物及其結合蛋白

SDS-PAGE銀染檢測圖

pull-down實驗報告

6-7周

實驗樣本

生物素標記的化合物和單生物素對照

實驗信息表





LC-MS/MS檢測及數據分析

質譜檢索結果及報告

互作蛋白篩選表格

生信分析結果和報告




化合物pull-down實驗服務外包—樣本要求


樣本類型
化合物pull down WB建議送樣量化合物pull down MS建議送樣量
動物細胞
3*10e7個細胞/組(約3個10cm皿)5*10e7個細胞/組(約5個10cm皿)
動物組織1g/組2g/組
植物葉片2g/組4g/組
植物根或果實4g/組8g/組
菌體50ul菌體沉淀/組100ul菌體沉淀/組

▲注意:以上均為每組樣本的送樣量,如果實驗和對照組用的樣本一致,此樣本量*2。詳細送樣指南可聯系輝駿生物索取。

保存及運輸:-80℃保存,干冰取樣/運輸,至少在送樣前2天通知我司。




藥物Pull down技術服務結果示例


化合物pull-down.jpg

 藥物Pull down MS產物銀染圖 


RNA pulldown質譜檢索表格

 藥物Pull down MS質譜檢索表格(部分展示)


分析結果

 潛在結合蛋白的生物信息學分析結果(部分展示)




小分子Pull Down實驗參考文獻


Chen X. et al: Celastrol induces ROS-mediated apoptosis via directly targeting peroxiredoxin-2 in gastric cancer cells. Theranostics. 2020.

使用相關技術:RNA pull down MS、小分子pull down、化合物pull down、藥物pull down





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