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IP / Pull down Beads標簽抗體分子互作試劑盒基因表達產品內參抗體分子互作單品
Flag免疫共沉淀試劑盒
 名稱 貨號 規格 貨期價格

ChainFree? Flag標簽免疫共沉淀試劑盒(動物)

 FI8801 12次/24次

 現貨






 ChainFree? HA標簽免疫共沉淀試劑盒動物)

 FI8806 12次/24次 現貨

 ChainFree? Myc標簽免疫共沉淀試劑盒動物)

 FI8807 12次/24次 現貨
 ChainFree? GFP標簽免疫共沉淀試劑盒動物) FI8808 12次/24次 現貨
 ChainFree? mCherry標簽免疫共沉淀試劑盒動物) FI8809 12次/24次 現貨

 ChainFree? Flag標簽免疫共沉淀試劑盒植物

 FI8811 12次/24次

 現貨

 ChainFree? HA標簽免疫共沉淀試劑盒植物)

 FI8816 12次/24次 現貨

 ChainFree? Myc標簽免疫共沉淀試劑盒植物)

 FI8817 12次/24次 現貨
 ChainFree? GFP標簽免疫共沉淀試劑盒植物) FI8818 12次/24次 現貨
 ChainFree? mCherry標簽免疫共沉淀試劑盒植物) FI8819 12次/24次 現貨


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ChainFree? 系列標簽抗體免疫共沉淀試劑盒簡介



       DNA重組技術使目標蛋白帶上特定標簽,表達的融合蛋白再采用標簽抗體來檢測,為科學研究帶來了極大便利。常見的蛋白標簽包括Flag、HA、Myc、V5等,這些標簽分子量小,對融合蛋白的活性和細胞內定位幾乎沒有影響。  


        針對不同樣本的需求,輝駿生物開發了分別針對植物和動物樣本的5款ChainFree?標簽抗體免疫共沉淀試劑盒:


 產品名稱
識別的標簽序列磁珠偶聯抗體
 ChainFree? Anti-Flag CoIP試劑盒 DYKDDDDK優化并重組表達的無輕、重鏈的Flag抗體
 ChainFree? Anti-HA CoIP試劑盒 YPYDVPDYA優化并重組表達的無輕、重鏈的HA抗體
 ChainFree? Anti-Myc CoIP試劑盒EQKLISEEDL優化并重組表達的無輕、重鏈的Myc抗體
 ChainFree? Anti-GFP CoIP試劑盒GFP或EGFP綠色熒光蛋白優化并重組表達的無輕、重鏈的GFP抗體
 ChainFree? Anti-mCherry CoIP試劑盒mCherry紅色熒光蛋白優化并重組表達的無輕、重鏈的mCherry抗體


        實驗前先將Flag標簽、HA標簽或GFP標簽等與目標蛋白在樣本中融合表達。裂解樣本后,將標簽抗體磁珠加入樣本中,標簽抗體與目標融合蛋白及其結合蛋白形成復合體,去除未結合的蛋白后,可以采用多種方法洗脫蛋白質。分離的蛋白產物既可以用Western blot檢測已知蛋白,也可以用質譜(LC-MS/MS)鑒定未知蛋白。




免疫共沉淀CoIP試劑盒的應用方向


蛋白-蛋白間的相互作用是蛋白質發揮生物學功能的主要模式,蛋白質會通過結合不同的伙伴來行駛不同的功能,形成復雜的信號轉導網絡。CO-IP試劑盒采用Flag抗體磁珠、HA抗體磁珠、Myc抗體磁珠、GFP抗體磁珠或mCherry抗體磁珠捕獲樣本中天然結合的Flag融合蛋白、HA融合蛋白、Myc融合蛋白、GFP融合蛋白或mCherry融合蛋白,以及它們的互作蛋白,不需要購買誘餌蛋白的IP級別抗體,只需要在細胞或組織中表達融合flag標簽的誘餌蛋白,即可以利用標簽抗體完成內源性Co-IP實驗。以下列舉了可應用COIP試劑盒的幾個研究方向:

1. 病毒、細菌等病原體侵染宿主細胞的機制;

2. 酶和底物的作用機制;

3. 天然狀態蛋白調控復合體的研究。




 ChainFree?系列CoIP試劑盒-輝駿生物產品優勢



1. 無抗體輕重鏈污染:IP復合物無論采用非變性洗脫還是變性洗脫,均不會出現抗體的輕、重鏈污染問題。

2. 親和力強:低nM級別親和力,輕松應對低拷貝基因,或難轉染細胞系

3. 特異性強:抗體磁珠通過了20株以上的空白細胞系檢測,不易產生非特異吸附

4. 結合量高:每10 μL抗體磁珠可結合約10~15 μg重組蛋白。

5. 兼容性好:無論標簽在誘餌蛋白的N端或C端,都可以識別。

6. 穩定性好:通過了45℃高溫測試。

RIP試劑盒(rna免疫共沉淀試劑盒)-輝駿生物-價格低大量現貨.png



flag測試圖2.jpg   V5 磁珠宣傳圖.jpg


輝駿生物ChainFree?標簽抗體磁珠與其他同類產品對比圖

Western-Blot結果顯示:輝駿生物的ChainFree? 磁珠對誘餌蛋白的親和力強,IP效果優于sigma產品,遠高于國產同類磁珠效果,并且不會產生抗體輕重鏈污染。


溫度測試.jpg

輝駿生物ChainFree?標簽抗體磁珠穩定性測試圖

Western-Blot結果顯示:ChainFree? 磁珠在45℃條件下放置7天,穩定性幾乎不受影響。





ChainFree?系列:Flag免疫共沉淀試劑盒組分


 試劑名稱
 體積12 Tests 體積24 Tests 保存條件

 ChainFree? Anti-Flag/HA/Myc/GFP/mCherry磁珠

 250 μL 500 μL 4 ℃
 裂解緩沖液 7 mL 14 mL 4 ℃
 漂洗液 25 mL 50 mL 4 ℃
 洗脫緩沖液 650 μL 1.3 mL -20 ℃
 蛋白酶抑制劑 190 μL 380 μL -20 ℃




Flag/HA/Myc/GFP/mCherry標簽免疫共沉淀試劑盒使用流程簡述


1. 裂解樣本;

2. 樣本裂解液與Flag磁珠(或HA磁珠、V5磁珠)孵育;

3. 漂洗、洗脫得到目標蛋白及其互作蛋白復合物。




Anti-Flag CoIP試劑盒使用案例


輝駿生物Flag免疫共沉淀試劑盒使用案例

Co-IP western-blot結果圖




Flag免疫共沉淀(flag co-ip)試劑盒—客戶文章


1. Li H.B. et al: The plant ESCRT component FREE1 shuttles to the nucleus to attenuate abscisic acid signaling. Nature Plants. 2019,IF=17.352.
【研究內容】:客戶發現,作為內體蛋白分選轉運復合體成分之一的FREE1基因,受到脫落酸刺激時候會發生磷酸化并移位到細胞核。客戶利用酵母雙雜交技術找到兩個核蛋白ABF4 and ABI5會與FREE1結合,免疫共沉淀CoIP實驗進一步證實了FREE與這兩個蛋白的互作。后續實驗表明,FREE1通過抑制ABF4、ABI5對下游基因的調控能力,參與了脫落酸信號通路。
使用相關技術:質譜鑒定、免疫共沉淀CoIP、Co-IP MS實驗



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